文件名称：pfs基因原核表达载体的构建、表达及蛋白纯化 (2015年)
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更新时间：2024-05-27 03:31:26
工程技术 论文
以植物乳杆菌KLDS1．0391的基因组DNA为模板，采用PCR方法扩增得到pfs基因，与GenBallk中的序列对比发现同源性为99％。将目的基因与表达载体pQE-30连接，并将重组质粒pQE-30-pfs转化到E．coli M15中。异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白，经SDS-PAGE分析，在全菌体蛋白中含有一条明显的特异性蛋白条带，大小约为27．4ku，经Ni-NTA纯化系统纯化后，在SDS-PAGE凝胶电泳图上获得纯化产物的条带。结果表明，原核表达栽体pQE-30-pf