【文件属性】：
文件名称：sCAR-ppAb基因的原核表达载体构建及重组蛋白的表达纯化 (2010年)
文件大小：653KB
文件格式：PDF
更新时间：2021-04-22 23:25:05
自然科学 论文
为获得腺病毒受体SCAR与掌叶半夏蛋白(PPA)的亚基B(PPAb)的融合蛋白,将PPAb基因克隆入已构建的原核表达载体pQE30-SCAR中,经PCRJa})Qlj序鉴定正确的重组质粒pQE30-SCARPPAb,转化大肠杆菌M15后获得工程菌。该菌株经IPTG诱导后,高效表达出带有组氨酸标签以包涵体形式存在的融合蛋白SCAR-PPAbo包涵体经过尿素变性溶解,PBS稀释复性、Ni离子亲和层析柱纯化,获得目的蛋白。SDS-PAGE&Westernblotting分析表明,在42kD左右有一条明显的特异性