文件名称：草鱼NEDD4结合蛋白基因1原核表达条件的优化及纯化 (2013年)
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更新时间：2024-06-04 19:12:25
自然科学 论文
通过PCR 方法克隆草鱼（Ctenopharyngodon idellus）NEDD4 结合蛋白基因1（简称CiN4BP1）的开放阅读框（ORF）序列，将扩增产物与pET-32a(+)表达载体相连接，构建原核表达载体pET-N4BP1，对重组质粒进行酶切和测序鉴定，然后将其导入大肠杆菌BL21(DE3)，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，检测该蛋白表达情况。SDS-PAGE 分析表明，在温度为37 ℃，IPTG 浓度为0.06 mmol/L，诱导时间为4 h 时，N4BP1 重组融合蛋白的表