文件名称:GST-β-catenin-His双标签融合蛋白的原核表达、纯化及鉴定* (2012年)
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更新时间:2024-06-09 18:48:43
自然科学 论文
应用RT-PCR技术扩增β-catenin的cDNA序列,并且在基因下游引入6×His标签序列,克隆至表达载体pGEX-4T-1.经测序鉴定后,将重组质粒转入BL21pLysS感受态细菌,经 IPTG诱导表达,采用Glutathione Sepharose 4B和Ni柱分步纯化GST-B-catenin-His融合蛋白.所得产物经SDS-PAGE检测,在114 kDa处显示特异条带,与GST-β-catenin-His融合蛋白预期分子量相符。经Western Blotting鉴定,所纯化蛋白能被β-cat