文件名称：重组牛肠激酶轻链在大肠杆菌中的表达和纯化 (2007年)
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更新时间：2024-05-19 03:32:36
自然科学 论文
密码子优化全基N合成了牛肠激酶轻链基因（sBEKLC），采用pET-39b（+）构建了融合表达载体，在大肠杆菌中进行了成功表达。37℃在含30 mg/L卡那霉素的LB培养基中培养，当细胞密度（D 600）达到0.5时，降低温度到28℃，加入终浓度为0.1 mM的异丙基硫代β-D-硫代半乳糖苷诱导外源蛋白表达，继续培养6 h后收集菌体，融合蛋白（DsbA-sBEKLC）产量达到151.2mg/L，相当于80.6 mg/L sBEKLC。使用渗透冲击技术从细胞周质中提取sBEKLC，经过亲和层析可从每升发酵液