文件名称：重组抑肽酶的表达纯化和活性测定 (2007年)
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更新时间：2024-05-27 04:54:49
自然科学 论文
抑肽酶是一种用途广泛的丝氨酸蛋白酶抑制剂。用基因重组技术将化学合成的抑肽酶基因插入表达载体pET28a，并转化至大肠杆菌Rosetta（DE3）中，经IPTG诱导后，表达产物以包涵体形式存在于菌体内包涵体纯化后经复性及CM-阳离子交换层析后，从每升培养液可获得2.4 mg抑肽酶，纯度可达90%。活性测定结果显示，重组抑肽酶可竞争性抑制纤溶酶对小分子底物S2251的水解活性。抑制常数（Ki）为（0.6±0.3）nmol/L，与天然抑肽酶的抑制活性相似。