文件名称：在大肠杆菌中融合表达重组羧肽酶抑制剂 (2006年)
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更新时间：2024-06-08 17:18:17
工程技术 论文
利用PCR技术扩增得到编码土豆羧肽酶抑制剂（carboxypeptidase inhibitor from potato，CPI）活性多肽基因，克隆于表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点中，得到重组质粒pGCPI，测序后将重组质粒转化到受体茵Escherichia coli BL21中。重组茵经IPTG诱导表达，超声波破菌后，通过谷胱甘肽sepheroseFF亲和层析柱一步纯化得到融合蛋白，纯度大于97%。融合蛋白经凝血酶切割并分离除去谷胱甘肽-S-转移酶后得到纯度大于98%的重组CPI，ELISA鉴定