精氨酸脱亚胺酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化 (2011年)

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文件名称:精氨酸脱亚胺酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化 (2011年)

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更新时间:2024-06-10 04:59:47

工程技术 论文

通过PCR扩增得到菌株编码ADl的arcA基因,并构建表达载体pET24a-ADI。将该载体导入大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达ADI基因的重组菌。对ADI诱导表达条件进行优化,结果发现宿主菌在A600达到1.0时加入0.2 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),在30℃诱导4 h酶活最高,为2.04 U/mL发酵液。经超声波破碎、HiPrep DEAE FF阴离子交换层析、 Superdexl TM200凝胶过滤层析,可获得SDS-PAGE电泳纯重组精氨酸脱亚胺酶(rADI)。r


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