文件名称：突变人GM-CSF基因在大肠杆菌中的表达及纯化 (2006年)
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更新时间：2024-05-26 10:39:09
自然科学 论文
目的 构建重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）的高效表达质粒，将其表达产物用于分离纯化的研究。方法 用人外周血单核细胞获得总RNA作为模板和修饰的5端密码子的引物经RT-PCR反应扩增到人GM-CSF基因，插入温控表达载体pDH构建了突变的hGM-CSF表达质粒，并将在E. coli中获得表达的突变rhGM-CSF包含体8mol/L脲提取液进一步用离子交换色谱柱分离纯化。结果 rhGM-CSF在大肠杆菌表达占菌体总蛋白量的22%，用弱阴离子交换色谱对rhGM-CSF的工程菌表达产物