诺卡氏菌腈水合酶突变基因在重组大肠杆菌中的高活性表达 (2007年)

时间:2024-06-13 01:06:46
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文件名称:诺卡氏菌腈水合酶突变基因在重组大肠杆菌中的高活性表达 (2007年)

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更新时间:2024-06-13 01:06:46

自然科学 论文

为了提高腈水合酶基因的重组表达水平,提出了3种基因策略:在重组大肠杆菌*表达激活子序列、在重组毕赤酵母中表达以及对α亚基的起始密码子进行定点突变。结果表明:对α亚基的起始密码子进行定点突变的基因策略为最佳方案,突变后的腈水合酶基因在重组E. coli XL1-Blue(pUC18-NHBAM)中表达时,腈水合酶的比酶活(以干菌质量计)提高到51 U/mg。进一步以pET28a为载体,插入突变后的腈水合酶基因,构建重组菌株E. coli BL21(DE3)/pETNHM。对优选菌株进行培养条件和诱导条件的


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