文件名称:壳聚糖酶基因在解脂耶氏酵母中的表达及重组酶性质研究 (2011年)
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更新时间:2024-06-12 23:55:50
自然科学 论文
为构建高效表达壳聚糖酶工程菌株,以Microbacterium sp.基因组为模板扩增壳聚糖酶基因,目的基因与表达载体pINA1317连接构建重组质粒,重组质粒Not工酶切线性化后转化解脂耶氏酵母Y.liPolytica Polh。所得结果为 PCR扩增得到约1000 bp的特异性片段,序列分析表明含有壳聚糖酶全长基因,开放阅读框801bp,编码266个氨基酸残基。转化子酶活力为10.4 U/mL,是原菌株酶活力的3.15倍。重组蛋白经DEAE-Sepharose FF分离纯化,达到电泳纯, SDS-PA