建鲤IL–1β和IL–8基因实时荧光定量RT–PCR检测方法的建立 (2014年)

时间:2021-06-14 10:40:58
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文件名称:建鲤IL–1β和IL–8基因实时荧光定量RT–PCR检测方法的建立 (2014年)
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更新时间:2021-06-14 10:40:58
自然科学 论文 根据GenBank上的基因序列,在保守区设定并合成特异性引物,选择β-actin作为内参基因,采用SYBRGreen I染料法,进行熔解曲线分析和标准曲线的制作。熔解曲线表明,β-actin、IL-1β、IL-8的基因产物均为特异性产物,其Tm值分别为86、82.5和84 ℃;标准曲线表明,各基因Ct值的检测范围为12~32,扩增效率分别为96.3%,103.2%和102.6%,具有良好的线性关系,且r2均大于0.990;组内变异系数分别为0.14%~0.86%,0.18%~0.93%和0.13%~0.8

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