文件名称：猪圆环病毒2型SYBR-Green1实时荧光定量PCR检测方法的建立 (2009年)
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更新时间：2024-06-02 14:28:12
自然科学 论文
【目的】建立一种能够快速、灵敏地检测猪圆环病毒2 型( PCV2) 的SYBR-Green1实时荧光定量PCR 方法。【方法】根据已报道的PCV2 ORF2基因组序列,设计并合成1 对引物。通过常规PCR扩增PCV2 ORF2 基因, 将鉴定正确的ORF2基因片段克隆入pTG19-T载体中, 转化大肠杆菌JM109, 经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR-Green1荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,并做灵敏性、特异性和重复性试验。【结果】PCV2荧光定量PCR标准曲线循环阈值