文件名称：应用实时荧光定量PCR检测外源基因拷贝数的新方法 (2009年)
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更新时间：2024-07-03 01:13:57
自然科学 论文
介绍一种采用实时荧光定量PCR法鉴定重组细胞株基因组中外源基因拷贝数的方法.首先根据研究对象建立标准品,以拟检测的外源基因设计特定的引物,得出标准曲线,然后在不同重组细胞株中对外源基因进行Real-Time PCR鉴定,根据结果与标准品比对得出实际的拷贝数.结果表明:以转染sPDGFRα基因的重组CHO-K1 细胞为例,采用该方法,利用标准品制备的标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性关系,并且具有较大的线性范围(10 1-10 5拷贝);测得各重组细胞株外源基因拷贝数不同,3次独立实验表明结果一致.与传