文件名称:人甲状旁腺素在甲醇毕赤酵母中的分泌表达 (2004年)
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更新时间:2024-05-27 23:00:20
自然科学 论文
选用酵母偏爱的密码子,人工合成长度为282 bp的人甲状旁腺素(hPTH)基因,将其克隆于M13载体中, DNA测序验证正确。通过PCR从含有hPTH基因的M13载体获得了该基因,将其插入到含有AOX1启动子和a因子信号肽序列的表达载体pPIC9K中,构建了重组质粒pPIC9K-hPTH,电击法转化甲醇毕赤酵母(Pichia pastoris) GS115菌株,经G418筛选得到高拷贝转化子,甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明在9.3 kDa处有明显的诱导蛋白带,与报道的hPTH的