文件名称：人瘦素基因在毕赤酵母中的分泌表达 (2013年)
文件大小：447KB
文件格式：PDF
更新时间：2024-07-04 07:56:56
自然科学 论文
将人瘦素成熟蛋白编码序列同义突变成毕赤酵母偏好密码子，人工合成全基因序列。将基因直接连接到pPIC9载体信号肽识别序列之后，构建毕赤酵母真核表达载体 pPIC9-hLeptin，电转化毕赤酵母菌株GSll5，用PCR法筛选阳性克隆，SDS-PAGE和Western blotting方法筛选能够稳定、高效分泌表达目的蛋白的酵母工程菌。结果表明，成功构建了重组人瘦素毕赤酵母工程菌株，能稳定、高效分泌表达重组人瘦素蛋白，表达量高峰出现在诱导96 h后，摇瓶表达量为200 mg?L-1。