文件名称：人溶菌酶基因在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性检测 (2011年)
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更新时间：2024-05-28 03:29:07
自然科学 论文
将PCR扩增的人溶菌酶编码基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中，双酶切和测序鉴定表明，重组载体构建正确。电转化毕赤酵母GSll5菌株，通过G418筛选获得高拷贝重组菌株后，用甲醇诱导表达；通过SDS-PAGE检测证明上清中有目的蛋白，表达产物与预期大小的人溶菌酶蛋白分子质量15ku-致，其表达量占分泌总蛋白的32%。体外抑菌实验证实重组人溶菌酶蛋白对溶壁微球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草杆菌均有明显的抑菌作用，表明在毕赤酵母中成功表达了重组人溶菌酶。