文件名称:研究简报丝瓜ACC合成酶的原核表达、分离纯化及性质鉴定 (2004年)
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更新时间:2024-05-19 04:35:45
自然科学 论文
将构建成功的丝瓜 ACC合成酶cDNA的重组质粒,转化为大肠杆菌 BL21( DE3) ,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后得到特异性高效表达,表达蛋白以包涵体形式存在.包涵体经洗涤和 Zn 2 + 螯合柱层析,得到纯化蛋白. SDS-PAGE显示纯化蛋白分子量为55 000的单一蛋白带.经活性分析,该酶最适pH值为8 .5 ,米氏常数( K m )为44 .2μmol/ L .