文件名称：草胺膦抗性基因易bar的原核表达与蛋白质纯化 (2007年)
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更新时间：2024-06-02 14:20:45
自然科学 论文
通过PCR扩增，从pCAMBIA1300-bar质粒中获得bar基因编码区全长，经酶切鉴定和测序后证实，bar基因分离成功。用BamHⅠ和HindⅢ酶切，将bar基因与原核表达载体pET28a（+）连接，构建成重组质粒pET28 bar。将重组质粒pET28 bar转化大肠杆菌菌株BL21（DE3）后，获得高效表达。SDS-PAGE电泳分析显示，目的蛋白主要以包涵体形式存在，蛋白质分子量约为27ku。将包涵体离心、洗涤和纯化后，得到高纯度的目的蛋白。该蛋白可以替代植物外源蛋白进行转bar基因产品的食用安全