文件名称：重组人TRAIL胞外片段的原核表达系统选择及蛋白复性研究 (2006年)
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更新时间：2024-05-16 01:01:18
自然科学 论文
采用PCR技术从人肝脏cDNA文库扩增出编码114-281位氨基酸的TRAIL基因片段，将之克隆至原核表达载体pET一30a、pQEdO和pJLA503中，上述重组载体经IPTG诱导表达后，SDS?PAGE鉴定显示pET-30a系统表达效率最高，目的蛋白占菌体总蛋白含量的40%左右；采用透析法或梯度稀释法对TRAIL胞外区片段包涵体进行复性，非还原SDS。PAGE的结果显示梯度稀释法明显好于透析法；纯化后的TRAIL胞外区片段蛋白具有明显的生物学活性，效果与标准品相似；通过添加不同的折叠促进剂对复性效率影