文件名称：宇佐美曲霉阿魏酸酯酶A基因的克隆表达及酶学性质研究 (2013年)
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更新时间：2024-05-28 06:06:57
工程技术 论文
本研究通过RT-PCR技术从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001中克隆了编码阿魏酸酯酶A的成熟肽cDNA(AusfaeA)，构建重组表达质粒pPIC9K-AusfaeA，将其经Sac Ⅰ线性化后转化毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115，通过抗G418筛选获得高拷贝重组子GS115／AusfaeA，用甲醇诱导表达重组阿魏酸酯酶(reAusFaeA)。SDS-PAGE显示，纯化后的reAusFaeA为单一条带，其表观相对分子质量为36 000；以阿魏酸甲酯为底物，经高效液相