文件名称:一个外切菊粉酶基因的克隆表达及酶学性质 (2013年)
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更新时间:2024-06-02 01:57:09
自然科学 论文
从马克斯克鲁维酵母(Kluyveromycesmarxianus)DSM5418中克隆出外切菊粉酶(INU)的成熟肤编码区域,在毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中实现了高效分泌表达,体积酶活力达到15.27U/mL,进一步对重组酶进行了纯化与表征。经过(NH4)2SO4沉淀、透析和分子筛过滤后,得到了纯度大于95%的纯化重组酶,SDS-PAGE分析发现INU的表观相对分子质量为9.0×104,大于理论预测值6.0×104。纯化酶液的表征结果表明,INU的最适温度和最适pH分别为55℃和5