文件名称：大肠杆菌苹果酸脱氢酶基因mdh的克隆、高效表达及酶学性质 (2011年)
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更新时间：2024-05-28 05:57:17
工程技术 论文
以大肠杆菌基因组DNA为模板，扩增得到苹果酸脱氢酶（mdh）编码基因mdh，构建了重组茵pET-28a-mdh/BL21并成功表达了mdh，大小约36000。选用Ni柱亲和层析法纯化具有活性的苹果酸脱氢酶（mdh），纯化后比酶活达到112.5U/mg，纯化倍数达2.62倍，回收率为59%。并对该酶的酶学性质进行了初步研究，其中反应最适pH值为6.0，在pH值2.0～6.0范围内稳定；反应最适温度为37℃，在42℃以下酶的稳定性较好。K+对酶有明显的激活作用，Cu2+对酶有抑制作用，Hg2+和Zn2+对酶有