文件名称：天门冬酰胺酶基因在黑曲霉中的同源表达 (2015年)
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更新时间：2024-06-12 00:05:22
工程技术 论文
根据NCBI中的黑曲霉天门冬酰胺酶基因asp序列(GI：145231287)设计特异性引物．从黑曲霉CICC2462基因组中扩增asp基因编码区，构建其黑曲霉表达载体pSZHG-Asp。通过农杆菌介导法转化黑曲霉，筛选以asp基因置换糖化酶基因glaA的同源重组转化子。对转化子的表达产物进行SDS-PAGE分析和酶活检测。获得8株在glaA。位点发生基因置换的同源重组转化子，并对其中4株的上清液进行检测。SDS-PAGE结果显示，在42 000处有目的蛋白质条带．重组菌株的目的蛋白质表达量为185～417