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文件名称：大肠杆菌菌株 ATCC 25922碱性磷酸酶的 原核表达、纯化及其活性研究 (2010年)
文件大小：1.1MB
文件格式：PDF
更新时间：2021-05-10 02:46:49
自然科学 论文
使用常规 PCR法以大肠杆菌菌株 ATCC 25922基因组为模板,克隆到该菌株的碱性磷酸酶成熟 肽基因,并将其构建到原核表达载体 pET-30a( +)的 Bam HⅠ、XhoⅠ之间,获得重组表达载体 pET-30a-EAP。 并且我们将 pET-30a-EAP转化到大肠杆菌 RosettaTM( DE3) pLysS中,经 IPTG诱导表达后,获得大小为52 ku 的目的蛋白 EAP。经试验证明该蛋白以可溶形式为主。进而,高效表达的重组碱性磷酸酶经亲和层析法纯化 后被用于活性鉴定。pNPP的显色反应与