文件名称：人溶菌酶N端与Exendin-4嵌合蛋白的基因克隆及原核表达 (2009年)
文件大小：892KB
文件格式：PDF
更新时间：2024-05-13 04:47:35
自然科学 论文
目的:克隆嵌合多肽人溶菌酶N端-Exendin-4基因并进行原核表达和纯化。方法:通过重组 PCR技术将人溶菌酶N端74个氨基酸的基因序列与Exendin-4多肽基因序列相连接,其间引入一段由凝血酶和二肽基肽酶识别位点组成的连接序列。以嵌合基因 hLYZ( N74)-Ex4与质粒 pET-32a( +)构建原核表达体,转化大肠杆菌BL21( DE3)并诱导表达。表达蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化、W estern blotting鉴定;透析复性后,以肠激酶切割并回收目的多肽。结果:重组质粒 pET-32a