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文件名称：水疱性口炎病毒N基因原核表达载体的构建及表达 (2004年)
文件大小：305KB
文件格式：PDF
更新时间：2021-05-13 20:12:19
自然科学 论文
针对水疱性口炎病毒(VSV)N基因设计特异性引物，在引物中分别加入EcoR I和Xho I酶切位点。RT-PCR扩增后得到目的基因，将其克隆到表达载体pET30c，连接产物转化于DH5α菌株，在含Kan+的平板上37℃培养24 h，然后挑取白色菌落，鉴定为阳性者，转化于BL21菌株，再经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导获得高效表达。表达融合蛋白分子质量为53 ku(目的蛋白大约47 ku)，同预期蛋白大小相近。Western blot检测表明，其能与本病毒阳性血清发生特异性反应，表达蛋白有望成