文件名称：黑曲霉分泌表达载体的构建以及绿色荧光蛋白的表达 (2013年)
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更新时间：2024-06-12 04:56:24
自然科学 论文
采用PCR扩增得到糖化酶基因启动子(PglaA-g)、色氨酸合成酶基因终止子(TtrpC)和潮霉素抗性筛选标记基因,依次连接这些基因元件,获得黑曲霉Aspergillus niger分泌表达载体pPHT. EGFP基因与黑曲霉表达载体pPHT连接,得到重组表达载体pPHT-EGFP.pPHT-EGFP表达载体通过原生质体转化法转化黑曲霉,经潮霉素抗性筛癣基因组PCR鉴定阳性重组转化子.荧光显微镜观察表明,绿色荧光蛋白成功表达,而且荧光的分布具有一定的规律,主要集中在菌丝顶端、膈膜以及培养基中;固体培养基发