文件名称：简并引物法克隆保加利亚乳杆菌β-N-乙酰氨基己糖苷酶基因 (2013年)
文件大小：956KB
文件格式：PDF
更新时间：2024-06-03 13:25:34
工程技术 论文
β-N-乙酰氨基己糖苷酶(β-Hexcase)在细菌、植物和动物中广泛存在,具有典型的外切酶活性并可以催化切除β-N-乙酰氨基己糖的非还原性氨基己糖残基,在细菌细胞分裂中具有重要作用. 选取与保加利亚乳杆菌LJJ亲缘关系近的菌种的β-N-乙酰氨基己糖苷酶蛋白序列,利用ICODEHOP和CODEHOP在线简并引物设计软件设计β-Hexcase简并引物,选取Hex1-f和Hex1-r引物对,以LJJ基因组DNA为模板经PCR扩增得到614 bp产物. PCR产物连接pGEM-T质粒载体后克隆至大肠杆菌DH5α