文件名称:香蕉线条病毒MP功能域基因的克垄原核表达及抗血清制备 (2014年)
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更新时间:2024-07-05 02:24:31
自然科学 论文
[目的]制备香蕉线条病毒广东分离物(BSV-GD)MP功能域基因编码蛋白的多克隆抗血清,为 BSV基因编码蛋白功能的研究提供条件。[方法]对 BSV-GD ORF3基因氨基酸序列进行生物信息学分析,得出 MP功能域基因序列,克隆该基因并插入载体 pET-28b( +)构建原核表达载体,经 IPTG诱导表达后,采用超声波裂解法进行蛋白可溶性分析,利用组氨酸标签纯化试剂盒对目的融合蛋白进行纯化和回收,然后以纯化的目的蛋白为抗原免疫健康家兔制备其多克隆抗血清;通过 Western-blot分析该抗血清的特异性,