文件名称:芜菁皱缩病毒P38蛋白的原核表达及抗血清的制备 (2015年)
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更新时间:2024-05-15 23:24:59
自然科学 论文
从感染芜菁皱缩病毒(TCV)的拟南芥中提取总RNA, 通过反转录PCR(RT PCR)扩增得到TCV的外壳蛋白基因P38. 在目的基因ORF框两边引入酶切位点 BamHⅠ和SacⅠ, 并连接到表达载体pET30 a上, 导入大肠杆菌BL21(DE3)中, 37 ℃经0.5mM/LIPTG诱导6 h后获得了分子量约为48 kD的融合蛋白. 经Ni NTA纯化目的蛋白, 注射大白兔制备抗血清. Western blot结果表明制备好的抗血清能成功检测感染TCV的拟南芥.