文件名称：牛凝乳酶全长cDNA的克隆及其原核表达载体的构建 (2010年)
文件大小：320KB
文件格式：PDF
更新时间：2024-05-29 19:14:42
工程技术 论文
从小牛皱胃中提取凝乳酶（Chymosin）总RNA，经过RT-PCR获得凝乳酶cDNA，纯化后与pMD-l8T载体连接，转化大肠杆菌JM109，通过双酶切和序列测定，获得了凝乳酶全长基因序列。序列测定表明，凝乳酶全长核苷酸长度为1 143 bp，编码381个氨基酸。与GenBank上已发表序列NM_180994进行比较，核苷酸同源性为99.56%。将该基因片段克隆到原核表达载体pET-22b中，构建重组质粒pET-22b/Chymosin，所获重组质粒经过酶切、测序鉴定，证实含有目的片段，且连接、构建正确