文件名称：枇杷醇腈酶基因的克隆及结构分析 (2011年)
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更新时间：2024-07-08 08:04:44
自然科学 论文
根据已知的杏仁、黑樱桃醇腈酶基因序列设计了一对同源引物，扩增得到枇杷醇腈酶基因的部分序列．分别设计了三条基因特异性引物和一条基因非特异性引物，采用改进的SEFA PCR方法，进行上下游未知序列的扩增，成功地获得包括启动子区、转录终止子在内的枇杷醇腈酶基因序列，全长5．5 kbp．所得醇腈酶基因含有4个外显子和3个内含子．编码的氨基酸残基序列包括25个氨基酸残基的信号肽和527个氨基酸残基的成熟酶蛋白．采用重叠延伸PCR方法将4个外显子连接获得了连续的醇腈酶编码基因，与pE327b(+)质粒成功构建表达载体