大黄欧文茵中蔗糖异构酶基因的克隆表达及应用 (2011年)

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文件名称：大黄欧文茵中蔗糖异构酶基因的克隆表达及应用 (2011年)
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更新时间：2021-05-08 05:28:09
自然科学 论文 以大黄欧文菌(Erwinia rhapontici)NX-5基因组DNA为模板，PCR扩增得到编码蔗糖异构酶(SIase)的基因pal I，构建克隆载体pUC18-pal I。经测序正确后，将pal I亚克隆至表达载体pET-22b(+)上，并在 E.coli BL21(DE3)中成功表达相对分子质量约为66 000的可溶性蛋白。通过Ni-NTA柱对表达产物进行纯化，纯酶的比活为40 U／mg。转化条件研究表明：重组菌能够高效转化质量分数为50％的蔗糖溶液，转化液中异麦芽酮糖得率为85％。