文件名称：SAM合成酶基因的克隆及在酿酒酵母中的高效表达 (2008年)
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更新时间：2024-06-11 18:48:12
自然科学 论文
采用PCR技术从S. cerevisiaeTCCC31012菌株的染色体DNA中扩增得到S-腺苷甲硫氨酸合成酶-2基因（sam2），将sam2克隆到酿酒酵母表达载体pACT2的强启动子PADH1控制下，以构建高效表达质粒，并在酿酒酵母亮氨酸缺陷型菌株YS58中表达。重组质粒经鉴定含有sam2基因。工程菌YS58-2表达产物经SDS-PAGE，结果显示重组菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶的分子质量约为43，ku，经凝胶电泳扫描，表达带约占菌体总蛋白的14%。YS58-2菌株培养72，h的SAM合成酶活力为16.5，