文件名称：绿色木霉EG III基因的克隆及其在工业酿酒酵母中的整合表达* (2009年)
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更新时间：2024-06-17 09:06:23
自然科学 论文
通过RT-PCR从绿色木霉AS3.3711中克隆得到EG III基因，序列分析显示该基因编码序列全长为1257 bp，编码418个aa，且自身带有21个aa的信号肽序列，与里氏木霉eg3的同源性为99.6％。将该基因连入酿酒酵母多拷贝整合型表达载体pSeIKP中获得重组质粒，线性化后电转化酿酒酵母工业菌株AS2.489，通过 SDS-PAGE蛋白电泳、刚果红染色和酶活测定对转化子进行了分析。结果表明：转化子有明显的重组EG III表达带，能够产生CMC水解圈，说明eg3基因已在酿酒酵母中获得了正确的分泌表