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文件名称：嗜热菌 Pyrococcus horikoshii OT3蛋白酶基因的原核表达、纯化和性质表征 (2010年)
文件大小：1.3MB
文件格式：PDF
更新时间：2021-05-24 00:26:28
自然科学 论文
将来源于嗜热菌 Pyrococcus horikoshii OT3的蛋白酶( PH1704)基因在大肠杆菌 BLP-CodonPlus中高效表达。采用超声、热失活和HiTrap Q Sepharose柱层析等方法对产物进 行分离纯化。通过SDS-PAGE,Native-PAGE和Western-blot对表达产物进行鉴定,发现该重 组酶以十二聚体为主的寡聚体形式存在,并具有SDS抗性。蛋白酶活力染色表明,其六聚体 以上有活力。以azo-gelation为底物,对其酶学性质进行初步研究表明,其最适温度为85