文件名称:淀粉结合域与a-淀粉酶的融合表达及其酶学性质 (2010年)
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更新时间:2024-06-02 02:19:47
自然科学 论文
利用RT-PCR从RhizopusoryzaeGX08总RNA中克隆到糖化酶的淀粉结合域(SBD)基因(sbd),将该基因片段插入a淀粉酶(CN7A)基因cn7a的5'端构建融合表达质拉pSE-sbdcn7a。嵌合酶SBD-CN7A在Escherichiaco-liJM109表达,并经Ni-NTA、SephacrylS300纯化。酶学性质研究表明:嵌合酶在最适作用条件方面与原始酶并无明显差别;在以生玉米粉为底物时,其比酶活提高了8.7倍,而以可溶性淀粉为底物时其比酶活是原始酶的1.8倍,Km也从3.784