文件名称：重组人促性腺激素-铜绿假单胞菌外毒素A蛋白的可溶性表达、纯化和对肿瘤细胞的抑制活性 (2013年)
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更新时间：2024-06-01 04:30:42
自然科学 论文
以人促性腺激素-铜绿假单胞菌外毒素A衍生物（GnRH-PE39KDEL）为研究对象，根据大肠杆菌密码子偏好性优化，通过基因合成的方法获得重组蛋白核酸序列，连接至pET-24b载体中，并转化入大肠杆菌BL21（DE3）及BL21（DE3）plyS中进行诱导表达。结果显示，在含有2 mg/mL葡萄糖的LB培养基中37℃培养至OD600约为0.6h，加入 0.2 mmol/L IPTG在30℃诱导2h后，重组蛋白可以实现可溶性高表达。工程菌经超声波破碎、高速离心后，经镍柱纯化和脱盐后得到重组蛋白，蛋白纯度达到9