文件名称：铜绿假单胞菌的LexA蛋白在大肠杆菌中的高效表达与纯化 (2007年)
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更新时间：2024-05-13 04:40:46
自然科学 论文
目的:对铜绿假单胞菌(Pseudomonas seruginosa,PA)的阻遏蛋白LexA进行基因克隆、重组表达及蛋白纯化。方法:采用KR法从PA01株基因组中扩增出1086 by的LexA基因,将此基因片段插人到表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。包涵体洗涤后用8 mol/L尿素溶解,以镍离子亲合柱层析作为第1步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第2步精细纯化,反相高相液相色谱法(HPLC )测定蛋白的浓度。结果LexA以包涵体形式表达,表达量为45%,经镍离子