文件名称：凝胶阻滞试验分析铜绿假单胞菌LexA蛋白与其靶位点的特异性结合 (2008年)
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更新时间：2024-05-17 10:55:34
自然科学 论文
目的:分析铜绿假单胞菌(pseudomonas aerugirnasa,PA)的LexA与其靶位点的特异性结合的特性。方法:以PCR法扩增PA的LexA基因,将其克隆于原核表达载体pET-226(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用镍离子亲合柱层析和Superdex-75凝胶过滤层析分离和纯化目的蛋白,以含推定LexA结合位点的片段CTGTN,ACAG为探针,用凝胶阻滞试验检测LexA蛋白与探针序列结合的能力及特异性。结果:构建了pET22b-LexA重组质粒,IPTG诱导目的蛋