文件名称：黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因克隆及在毕赤酵母中分泌表达 (2012年)
文件大小：334KB
文件格式：PDF
更新时间：2024-06-12 00:02:09
工程技术 论文
为大规模制备β-葡萄糖苷酶，构建重组酵母工程菌，实现β-葡萄糖苷酶的分泌表达。根据已报道黑曲霉(Aspergillus niger)β-葡萄糖苷酶cDNA序列设计一对引物，采用RT-PCR扩增，获得黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因(bgl)。构建了pMD-18T-bgl克隆载体，bgl亚克隆到质粒 pPIC9K，构建表达栽体pPIC9K-bgl。经Bgl Ⅱ线性化后电转入Pichia pastoris GS115，经过MD、 YPD/G418平板筛选阳性克隆，获得分泌表达重组P.pastoris GS115的工程