文件名称：黑曲霉中葡萄糖氧化酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达 (2013年)
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更新时间：2024-05-28 06:08:09
工程技术 论文
为了提高葡萄糖氧化酶的生产能力，提取和纯化了黑曲霉Aspergillus niger PCTC的基因组DNA，以此为模板进行PCR扩增获得葡萄糖氧化酶基因，经测序，所得基因全长1 772 bp，编码含有589个氨基酸的蛋白质。将目的基因和表达载体pPIC9K连接经电转化导入毕赤酵母 GS115中，在甲醇诱导和α信号肽的转运下，将葡萄糖氧化酶分泌到胞外。经G418梯度抗性平板和显色平板的初筛以及摇床复筛，获得了一株产葡萄糖氧化酶活力较高的菌株，该株菌在30℃、l80 r／min的培养条件下，经0．5％的甲醇