文件名称:拯救新城疫病毒LaSota株辅助质粒的构建 (2010年)
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更新时间:2024-05-13 17:34:53
自然科学 论文
本实验室保存的LaSota株新城疫病毒经SPF鸡胚增殖, 收集尿囊液并纯化病毒, 提取病毒基因组RNA.参考GeneBank收录的LaSota株新城疫病毒基因组序列, 设计6对特异性引物, 分别扩增病毒的NP、P和L1~L4六个基因片段, 并将目的片段回收纯化, 克隆至pMD18-T载体, 转化大肠杆菌DH5α, 小提质粒并酶切鉴定, 鉴定正确的样品进行序列测定, 并比对测序结果。结果证明测序结果与GeneBank上公布的LaSota株新城疫病毒序列完全一致, 没有任何氨基酸和核苷酸的变化, 将NP、P、