文件名称:Lrrc10蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备 (2011年)
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更新时间:2024-06-01 23:12:40
自然科学 论文
Lrrc10是一个心脏特异表达基因。为了深入研究Lrrc10在心脏发育中的功能,需要获得Lrre10蛋白并制备其抗体。以小鼠心脏cDNA文库为模板进行PCR扩增得到Lrrc10部分编码区序列,然后将其连接到pGEX-4T-1载体上获得原核表达载体。重组子经酶切及测序鉴定后,转化大肠杆菌(Eocoli)BL21,并用IPTG诱导融合蛋白表达,GST亲和层析法亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体。获得了Lrrc10原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔