文件名称：米黑霉脂肪酶基因的高效表达及活性测定 (2012年)
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更新时间：2024-06-05 17:51:08
工程技术 论文
为了实现米黑霉脂肪酶(RhizomucormieheiLipase，RML)基因在大肠杆菌中的高效表达，并得到大量的具有生物活性的脂肪酶，首先通过3种方式提高RML在大肠杆菌中可溶性蛋白的表达量：1)低温诱导（16GC)RML表达；2）新型分子伴侣（Skp）与RMLN端融合表达；3)载体pET32a上的Trx-tag与RMLN端融合表达。其次对各蛋白质进行纯化及活性测定，各种条件得到的RML比活在（226±10-247±10)U/mg。蛋白质表达结果显示：经低温诱导RML的效果最好，纯蛋白质量浓度为0.8