文件名称：卡门柏青霉-PG3脂肪酶基因的克隆、表达及活性分析 (2006年)
文件大小：313KB
文件格式：PDF
更新时间：2024-06-02 05:12:54
工程技术 论文
以卡门柏青霉-PG3为出发菌株，提取其总RNA，应用反转录．聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出860bp左右的片段，核苷酸序列分析表明其与甘油单-双酰酯脂肪酶(MDGL)基因(mdlA)一致。将此基因克隆到原核表达载体pET-28a中，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经诱导后，重组的脂肪酶(rMDGL)在宿主菌中得到表达，表达量可达菌体总蛋白量的45．2％。重组蛋白包涵体溶解、复性后用Ni2+组氨酸结合树脂螯合层析柱纯化，聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示为单一区带，其相对分子质量为41 000