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文件名称：溶藻弧菌dtd基因的克隆及原核表达条件优化 (2014年)
文件大小：554KB
文件格式：PDF
更新时间：2021-06-19 13:07:13
自然科学 论文
根据NCBI数据库中已发表的溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）全基因组序列合成一对特异性引物，应用聚合酶链式反应（PCR技术）扩增溶藻弧菌HY9001菌株dtd基因，将其定向克隆到原核表达载体pET-32a构建重组表达质粒pET-DTD，并对其进行诱导温度、诱导时间、诱导IPTG浓度等条件的优化，最后探究其纯化时最佳咪唑洗脱浓度。结果表明：DTD蛋白成功表达，且其以包涵体的形式存在，在诱导温度37℃、IPTG浓度0.1mmol/L条件下诱导5h表达量最高，纯化最佳咪唑洗脱浓度为150mm