文件名称:cnksr2基因干扰腺病毒的构建及鉴定 (2013年)
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更新时间:2024-06-12 07:10:36
自然科学 论文
构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定。根据小鼠cnksr2基因序列设计cnksr2干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的BglⅡ和HindⅢ位点,PmeⅠ酶切线性化的pShuttle-H1-Sicnksr2干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共同转化E.coliBJ5183感受态细菌,产生重组腺病毒载体。用PacⅠ酶切线性化的回收质粒,转染293A细胞,包装腺病毒颗粒,在倒置显微镜下观察细胞病理性变化(Cellpathologicaleffect,CPE),