文件名称:GGPPS基因干扰腺病毒载体的构建及鉴定 (2013年)
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更新时间:2024-05-29 21:51:29
自然科学 论文
构建GGPPS基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据GGPPS基因序列设计GGPPS干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-Hl的磁2Ⅱ和Hind Ⅲ位点,Pine Ⅰ酶切线性化的pShuttle-H1-SiGGPPS干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共同转化E.coli BJ5183感受态细菌,产生重组腺病毒载体.用Pac Ⅰ酶切线性化的回收质粒,转染293A细胞包装腺病毒颗粒,在倒置显微镜下观察细胞CPE,用TCID50法测定病毒颗粒的浓度,并初步观察病毒感染PC12细胞对目